Rob Bertholee is een Nederlands generaal buiten dienst van de Koninklijke Landmacht. Na zijn opleiding aan de Koninklijke Militaire Academie vervulde hij vanaf 1979 gedurende meer dan 36 jaar succesvol leidinggevende functies in de krijgsmacht met inzet in Kosovo en Afghanistan. De kroon op zijn carrière was de benoeming tot Commandant Landstrijdkrachten begin 2008.  Vanaf november 2011 was hij zeven jaar Hoofd van de Algemene Inlichtingen- en Veiligheidsdienst (AIVD). In een turbulente periode heeft hij de AIVD getransformeerd van bezuinigingsobject tot onmisbaar gesprekspartner van overheid en bedrijfsleven.  Hij heeft de internationale positie van de AIVD substantieel verstevigd. 

Vanaf november 2011 was hij vervolgens 7 jaar Hoofd van de Algemene Inlichtingen- en Veiligheidsdienst (AIVD).
In een turbulente periode heeft hij de AIVD getransformeerd van bezuinigingsobject tot onmisbaar gesprekspartner van overheid en bedrijfsleven.

In 2014 is hij gedurende een jaar roterend voorzitter geweest van het NATO Civil Intelligence Committee. In dat jaar heeft hij de samenwerking met het NATO Military Intelligence Committee op een significant hoger plan kunnen brengen.

In 2016 heeft hij een half jaar lang het roterend voorzitterschap bekleed over de Europese Counter Terrorism Group (CTG); onder zijn voorzitterschap heeft de CTG grote stappen gezet in de gezamenlijke informatieverzameling en informatiedeling op het gebied van contra-terrorisme. Onder meer daardoor heeft hij ook de internationale positie van de AIVD substantieel verstevigd.

In november 2018 heeft hij de leiding over de AIVD overgedragen aan zijn opvolger. Tot eind 2020 was hij speciaal adviseur bij de Algemene bestuursdienst ABD.
Hij heeft de Commissarissen-cyclus aan Nyenrode Business Universiteit succesvol afgesloten.

Na zijn opleiding aan de Koninklijke Militaire Academie vervulde Rob Bertholee vanaf 1979 gedurende meer dan 36 jaar succesvol leidinggevende en staffuncties in de krijgsmacht. In 1987 en 1988 heeft hij de twee- jarige in-company Hogere Militaire Vorming gedaan, in 1991 en 1992 gevolgd door de US Army Command and General Staff Officers Course. Tijdens deze laatste opleiding heeft hij een Masters’ Degree in Military Art and Science behaald. Hij is ingezet in Kosovo (2000) en Afghanistan (2003). In combinatie met zijn plaatsingen in Duitsland en de Verenigde Staten heeft hij ruim 10 jaar in een internationale omgeving gewerkt. Zijn benoeming tot Commandant Landstrijdkrachten begin 2008 beschouwt hij als de kroon op zijn carrière.